ÍNDICES

MYCOPLASMA GALLISEPTICUM ANTIBODY TEST KIT

BIOLÓGICO

IDEXX MG es un inmunoanálisis enzimático de IDEXX diseñado para la detección de anticuerpos frente a Mycoplasma gallisepticum (Mg) en suero de pollo y pavo.

DIMUNE S.A.

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Fórmula, composición o componentes del producto

Forma del producto

Usos o indicaciones terapéuticas

Dosis o posología

Preparación de las muestras

Diluir las muestras 1:500 con el Diluyente de la Muestra antes de efectuar la prueba (por ejemplo, diluir 1 μl de la muestra con 500 μl de Diluyente). NOTA: NO DILUIR LOS CONTROLES. Asegurarse de cambiar las puntas de las pipetas cada vez que se tome una muestra. Mezclar bien las muestras antes de añadirlas a la placa tapizada con antígeno Mg.

Procedimiento de la Prueba

Debe dejarse que todos los reactivos adquieran 18–26°C antes de usarlos. Los reactivos deberán mezclarse invirtiéndolos o agitándolos suavemente.

1	Obtener la placa (o placas) tapizada con antígeno y anotar la posición de las muestras.
2	Dispensar 100 μl de Control Negativo (CN) NO DILUIDO en los pocillos por duplicado.
3	Dispensar 100 μl de Control Positivo (CP) NO DILUIDO en los pocillos por duplicado.
4	Dispensar 100 μl de muestra DILUIDA en los pocillos correspondientes. Las muestras pueden analizarse por duplicado, pero el análisis en un solo pocillo es también aceptable.
5	Incubar durante 30 minutos (± 2 min.) a 18–26°C.
6	Eliminar el contenido líquido de cada pocillo y lavar cada pocillo con aproximadamente 350 μl de agua destilada o desionizada 3–5 veces. Evitar que las placas se sequen entre los lavados y antes de añadir el reactivo siguiente. Después del lavado final, eliminar el fluido de lavado residual de cada placa golpeándola sobre material absorbente.
7	Dispensar 100 μl de Conjugado a cada pocillo.
8	Incubar durante 30 minutos (± 2 min.) a 18–26°C.
9	Repetir el paso 6.
10	Dispensar 100 μl de Substrato TMB en cada pocillo.
11	Incubar durante 15 minutos (± 1 min.) a 18–26°C.
12	Dispensar 100 μl de la Solución de Frenado en cada pocillo.
13	Medir y anotar los valores de absorbancia a 650 nm, A(650).
14	Cálculos:
Controles
CNẋ= CN1 A(650) + CN2 A(650) 2		CPx = CP1 A(650) + CP2 A(650) 2
Criterios de Validación
CPẋ– CNẋ> 0,075		CNẋ≤ 0,150
En los ensayos no válidos, debe sospecharse de la técnica, y el ensayo tiene que repetirse siguiendo una revisión meticulosa del protocolo suministrado con el producto.
Muestras
M/P = Media de la Muestra – CNẋ CPẋ– CNẋ		Log10 del título = 1,09 (log10 M/P) + 3,36*
*Relaciona el cociente M/P en una dilución de 1:500 con un título final.
La presencia o ausencia de anticuerpos frente a Mg se determina por medio de una relación entre el valor de A(650) de la muestra con la media del Control Positivo. El Control Positivo está normalizado y representa concentraciones significativas de anticuerpos anti-Mg en el suero. La concentración relativa de anticuerpos en la muestra se determina a través del cálculo del cociente de la absorbancia de la muestra con respecto a la del Control Positivo, M/P. Los títulos finales de anticuerpos se calculan mediante la ecuación descrita arriba.
15	Interpretación:
Negativo		Positivo
M/P ≤ 0,50		M/P > 0,50
Un resultado positivo (títulos mayores que 1076) indican vacunación u otra exposición a Mg. Cada laboratorio debe establecer su propio criterio inmunidad con respecto al título de anticuerpos, de acuerdo con la correlación del kit IDEXX MG con los métodos laboratoriales actuales, y las respuestas del anticuerpo observadas en el pasado. Nota: IDEXX tiene a disposición instrumentos y sistemas de software para el cálculo de resultados y la elaboración de resúmenes de datos.

Precauciones y contraindicaciones

Conservación y Recomendaciones

Presentación

Empresa fabricante

Registro sanitario unificado No

Reactivos		Volumen
1	Placa tapizada con Antígeno Mg	5
2	Control Positivo — suero de pollo anti-Mg diluido, conservado con azida de sodio	1 x 1,9 ml
3	Control Negativo — suero de pollo diluido; no reactivo en Mg, conservado con azida de sodio	1 x 1,9 ml
4	Conjugado — conjugado (de cabra) anti-pollo/anti-pavo: peroxidasa de rábano, conservado con ProClinTM 150	1 x 50 ml
5	Diluyente de la Muestra — solución tampón, conservado con azida de sodio	1 x 235 ml
A	Substrato TMB	1 x 60 ml
B	Solución de Frenado	1 x 60 ml